heparin og heparansulfat (hs) glykosaminoglykaner er lineære sulfaterte polysakkarider lokalisert på celleoverflatemembraner og i ekstracellulære matriser i praktisk talt alle animalske vev. Heparin og HS har vært involvert i cellebiologiske prosesser, celleadhesjon og regulering av enzymatisk katalyse (1). HS-kjeder har vist seg å interagere med en rekke vekstfaktorer, kjemokiner, ECM-proteiner og enzymer, inkludert antitrombin, fibroblastvekstfaktorer og vaskulær endotelvekstfaktor (2). Heparin har vært mye brukt som et antikoagulerende legemiddel (3,4), og det har vist seg å regulere cellulær prosess ved binding, stabilisering og aktivering av ulike vekstfaktorer(5).

heparin/HS-kjeder består av gjentatte disakkaridenheter Av Glcaß 1-4GlcNAca1-4 med poly-dispergert sulfatering, N-acetylering og uronosylepimerisering. Gjentatte disakkaridrester som varierer mellom en til tre sulfatgrupper finnes i heparin / HS, noe som resulterer i domener med høy og lav sulfatering. Under biosyntese fører ufullstendig sulfatering ved transferaser til dannelsen av mer strukturelt komplekse polysakkarider enn for andre glykanklasser. Den strukturelle avklaringen av slike komplekse og mangfoldige polysakkarider er en svært utfordrende oppgave og kan ikke oppnås uten enzymverktøy.

Heparinlyaseenzymer, også kalt Heparinaser, er enzymer som spalter den glykosidiske forbindelsen mellom heksosaminer og uronsyrer og er kjent for å spalte heparin-og HS-kjeder selektivt via en eliminasjonsmekanisme. Heparinase enzymer skaper en dobbeltbinding på den ikke-reduserende enden av uronsyre som absorberer ved 232 nm og kan brukes til påvisning av oligosakkarid og disakkaridprodukter. Tre Heparinase enzymer er tilgjengelige: Bacteroides Heparinase I (NEB # P0735), Heparinase II (NEB # P0736 )OG Heparinase III (NEB # P0737). Heparinase i spalter høyt sulfaterte heparin / HS kjeder, Heparinase III spalter mindre sulfaterte hs kjeder, Mens Heparinase II spalter domener av både høy og lav sulfatering på både heparin og HS. Heparinase I, II OG III brukt i kombinasjon kan produsere en nesten fullstendig depolymerisering av heparin / HS polysakkaridkjeder til disakkarider.

Kategorier: Articles

0 kommentarer

Legg igjen en kommentar

Avatar placeholder

Din e-postadresse vil ikke bli publisert.